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Comment étalonner un HPLC

HPLC est un test de chromatographie en phase liquide à haute performance qui oblige les solvants à travers une colonne sous des pressions élevées allant jusqu'à 400 atmosphères. La haute pression rend ce test de chromatographie effectuer plus rapidement que d'autres tests de chromatographie avec des méthodes de détection pour HPLC automatisé et sensible. Afin d'effectuer HPLC, une série de normes d'étalonnage contenant les composés spécifiques dans lesquels vous testez nécessité d'être préparé en utilisant une courbe d'étalonnage.

Choses que vous devez

  • Colonne HPLC
  • Échantillons
  • L'eau HPLC
  • Normes pour les échantillons
  • Fioles jaugées
  • Microsoft Word ou Excel

Instructions

  1. Préparer une série de dilutions pour préparer des étalons contenant les composés qui sont à analyser. Faire les normes varient de 20 microgrammes par millilitre à 100 microgrammes par millilitre en utilisant des fioles jaugées. Utiliser de l'eau de qualité HPLC pour vos dilutions. Si vous analysez la caféine, par exemple, vous souhaitez obtenir une norme pour la caféine et diluer que de créer une courbe standard.



  2. Préparer votre échantillon que vous souhaitez analyser dans la HPLC. Par exemple, si vous souhaitez analyser la caféine, vous pouvez choisir thé ou de café.

  3. Diluer l'échantillon avec de l'eau de qualité HPLC pour qu'elle soit dans la plage d'échantillons.




  4. Injecter les échantillons dans la colonne de HPLC. Suivez les instructions spécifiques fournies par le fabricant pour votre colonne particulière.

  5. Faire un graphique des données obtenues pour vos solutions standard avec surface de pic par rapport à la concentration de l'échantillon.

  6. Déterminer la concentration de chaque composant présent dans l'échantillon à partir de la courbe standard que vous avez créé.

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